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信頼性の高い医療用遠心分離にはこれまで、高価でかさばる、電気に依存する商用機器の使用が必要でしたが、リソースが限られた環境では利用できないことがよくあります。いくつかのポータブルで安価な非電動遠心分離機が説明されていますが、これらのソリューションは主に、比較的少量の沈降を必要とする診断用途を目的としています。さらに、これらの機器の設計には、サービスが行き届いていない地域では通常利用できない特殊な材料やツールの使用が必要になることがよくあります。ここでは、治療用途向けの超低コストの人力操作のポータブル廃棄物ベース遠心分離機である CentREUSE の設計、組み立て、実験的検証について説明します。CentREUSE の平均遠心力は 10.5 相対遠心力 (RCF) ± 1.3 です。CentREUSE で 3 分間遠心分離した後の 1.0 ml のトリアムシノロン硝子体懸濁液の沈降は、12 時間の重力沈降後の沈降と同等でした (0.41 ml ± 0.04 vs 0.38 ml ± 0.03、p = 0.14)。CentREUSE で 5 分間および 10 分間遠心分離した後の沈殿物の濃厚化を、市販の装置を使用して 10 RCF (0.31 ml ± 0.02 対 0.32 ml ± 0.03、p = 0.20) および 50 RCF (0.20 ml) で 5 分間遠心分離した後に観察されたものと比較しました。 0.02 対 0.19 ml ± 0.01、p = 0.15)。CentREUSE のテンプレートと構築手順は、このオープンソースの投稿に含まれています。
遠心分離は、多くの診断検査や治療介入において重要なステップです1、2、3、4。しかし、適切な遠心分離を実現するには、これまで高価でかさばる、電気に依存する商用機器の使用が必要であり、リソースが限られた環境では利用できないことがよくあります 2,4。2017 年、プラカシュ氏のグループは、プレハブ材料で作られた小型の紙ベースの手動遠心分離機 (「ペーパー パファー」と呼ばれる) を 0.20 ドル ($)2 のコストで導入しました。それ以来、紙フーガは、少量の診断用途（たとえば、マラリア原虫を検出するための毛細管内の血液成分の密度に基づく分離）のためのリソースが限られた設定で導入され、超安価なポータブル人力機器を実証しました。遠心分離機２．それ以来、他のいくつかのコンパクトで安価な非電動遠心分離装置が記載されています4、5、6、7、8、9、10。ただし、これらの溶液のほとんどは、ペーパーフュームと同様、比較的少量の沈降量を必要とする診断目的を目的としているため、大量のサンプルの遠心分離には使用できません。さらに、これらのソリューションの組み立てには、サービスが行き届いていない地域では入手できない特殊な材料や工具の使用が必要になることがよくあります4、5、6、7、8、9、10。
ここでは、通常、大量の沈降を必要とする治療用途向けに、従来の紙フーガ廃棄物から構築された遠心分離機 (CentREUSE と呼ばれる) の設計、組み立て、および実験的検証について説明します。ケース 1、3 概念実証として、実際の眼科介入を使用してデバイスをテストしました。トリアムシノロンのアセトン (TA) 懸濁液を沈殿させ、その後眼の硝子体にボーラス薬剤を注入します。TA 濃度のための遠心分離は、さまざまな眼疾患の長期治療のための低コスト介入として認識されていますが、薬剤製剤中に市販の遠心分離機が必要であることが、リソースが限られた状況でこの治療法を使用する際の大きな障壁となっています 1,2、 3.従来の市販の遠心分離機で得られた結果と比較します。CentREUSE を構築するためのテンプレートと手順は、このオープンソース投稿の「詳細」セクションに含まれています。
CentREUSE は、ほぼすべてスクラップから構築できます。半円形のテンプレート (補足図 S1) の両方のコピーは、標準的な米国のカーボンレター用紙 (215.9 mm × 279.4 mm) に印刷されました。付属の 2 つの半円形テンプレートは、(1) 247 mm 回転ディスクの外縁、(2) 1.0 ml シリンジ (キャップと切断されたプランジャー付き) を収容するように設計されている、CentREUSE デバイスの 3 つの主要な設計特徴を定義します。(3) ロープがディスクを通過できるように穴を開ける位置を示す 2 つのマーク。
テンプレートを段ボールに貼り付けます（たとえば、万能接着剤またはテープを使用します）（最小サイズ：247 mm × 247 mm）（補足図S2a）。この研究では標準の「A」段ボール（厚さ 4.8 mm）を使用しましたが、廃棄された輸送箱からの段ボールなど、同様の厚さの段ボールを使用することもできます。鋭い道具 (刃やはさみなど) を使用して、テンプレート上に輪郭を描かれた外側ディスクの端に沿ってボール紙を切ります (補足図 S2b)。次に、細く鋭いツール (ボールペンの先端など) を使用して、テンプレート上になぞられたマークに従って、半径 8.5 mm の全厚の穿孔を 2 つ作成します (補足図 S2c)。次に、かみそりの刃などの尖ったツールを使用して、テンプレートとその下にある厚紙の表面層から 1.0 ml 注射器用の 2 つのスロットを切り取ります。下の波形層や残りの表面層を損傷しないように注意する必要があります（補足図S2d、e）。次に、紐（たとえば、3mmのクッキングコットンコードまたは同様の太さと弾力性の糸）を2つの穴に通し、長さ約30cmのディスクの各側面にループを結びます（補足図S2f）。
2 本の 1.0 ml シリンジにほぼ同量 (例: 1.0 ml の TA 懸濁液) を充填し、キャップをします。次に、シリンジプランジャーロッドをバレルフランジのレベルで切断しました（補足図S2g、h）。次に、シリンダーフランジはテープの層で覆われ、装置の使用中に切り取られたピストンが飛び出すのを防ぎます。次に、各 1.0 ml シリンジを、キャップがディスクの中心に面するようにシリンジウェルに配置しました (補足図 S2i)。次に、各注射器を粘着テープで少なくともディスクに取り付けました（補足図S2j）。最後に、ループ内の紐の両端に 2 本のペン (鉛筆や同様の丈夫な棒状のツールなど) を配置して、遠心分離機の組み立てを完了します (図 1)。
CentREUSE の使用方法は、従来の回転おもちゃの使用方法と似ています。回転は、両手でハンドルを握ることによって開始されます。弦がわずかに緩むと、ディスクが前方または後方に揺動し、ディスクがそれぞれ前方または後方に回転します。これは、弦が丸くなるように、ゆっくりと制御された方法で数回行われます。その後、動きを止めてください。弦がほどけ始めると、弦がピンと張った状態になるまでハンドルが強く引かれ、ディスクが回転します。弦が完全にほどかれ、巻き戻しが始まったらすぐに、ハンドルをゆっくりと緩める必要があります。ロープが再び巻き戻り始めたら、同じ一連の動作を適用してデバイスを回転させ続けます (ビデオ S1)。
遠心分離による懸濁液の沈降を必要とする用途の場合、満足のいく造粒が達成されるまでデバイスを継続的に回転させました（補足図S3a、b）。複雑な粒子がシリンジバレルのプランジャー端で形成され、上清がシリンジの先端に向かって集中します。次に、バレルフランジを覆っているテープを取り外し、2番目のプランジャーを導入してネイティブプランジャーをシリンジ先端に向かってゆっくりと押し、複合沈殿物に達したときに停止することによって上清を排出しました（補足図S3c、d）。
回転速度を決定するために、水を満たした 2 本の 1.0 ml シリンジを備えた CentREUSE デバイスを、定常振動状態に達した後、高速ビデオ カメラ (240 フレーム/秒) で 1 分間記録しました。回転ディスクの端近くのマーカーを、記録のフレームごとの分析を使用して手動で追跡し、1 分あたりの回転数 (rpm) を決定しました (図 2a ～ d)。n = 10 回の試行を繰り返します。次に、シリンジバレルの中間点での相対遠心力 (RCF) が、次の式を使用して計算されます。
CentREUSEによる回転速度の定量化。(A ～ D) デバイスの回転が完了するまでの時間 (分: 秒。ミリ秒) を示す連続した代表的な画像。矢印はトレース マーカーを示します。(E) CentREUSE を使用した RPM の定量化。線は平均 (赤) ± 標準偏差 (黒) を表します。スコアは個々の 1 分間のトライアルを表します (n = 10)。
注射用の TA 懸濁液 (40 mg/ml、Amneal Pharmaceuticals、ブリッジウォーター、ニュージャージー州、米国) を含む 1.0 ml シリンジを、CentREUSE を使用して 3、5、および 10 分間遠心分離しました。この技術を使用した沈降を、A-4-62 ローターを使用して Eppendorf 5810R 卓上遠心分離機 (ハンブルク、ドイツ) で 10、20、および 50 RCF で 5 分間遠心分離した後に達成された沈降と比較しました。沈殿量は、0 分から 720 分までのさまざまな時点で重力依存性沈殿を使用して得られた沈殿量とも比較されました。各手順について、合計 n = 9 回の独立した繰り返しを実行しました。
すべての統計分析は、Prism 9.0 ソフトウェア (GraphPad、サンディエゴ、米国) を使用して実行されました。値は、特に断りのない限り、平均±標準偏差（SD）として表示されます。両側ウェルチ補正 t 検定を使用してグループ平均を比較しました。アルファは 0.05 として定義されます。重力依存性の沈下については、最小二乗回帰を使用して単相指数関数的減衰モデルを当てはめ、特定の x 値に対する繰り返しの y 値を単一点として扱いました。
ここで、x は分単位の時間です。y – 堆積物の体積。y0 は、x がゼロの場合の y の値です。プラトーは、無限分の y 値です。K は速度定数であり、分の逆数で表されます。
CentREUSE デバイスは、それぞれ 1.0 ml の水を満たした 2 つの標準的な 1.0 ml シリンジを使用して、信頼性の高い制御された非線形振動を実証しました (ビデオ S1)。n = 10 回のトライアル (各 1 分) では、CentREUSE の平均回転速度は 359.4 rpm ± 21.63 (範囲 = 337 ～ 398) で、計算された平均遠心力は 10.5 RCF ± 1, 3 (範囲 = 9.2 ～ 12.8) となりました。 ）。(図 2a ～ e)。
1.0 ml シリンジ内の TA 懸濁液をペレット化するいくつかの方法を評価し、CentREUSE 遠心分離と比較しました。12時間の重力依存性沈降後、沈殿物の量は0.38 ml ± 0.03に達しました（補足図S4a、b）。重力依存の TA 堆積は、単相指数関数的減衰モデル (R2 = 0.8582 で補正) と一致しており、推定プラトーは 0.3804 mL (95% 信頼区間: 0.3578 ～ 0.4025) になります (補足図 S4c)。CentREUSE は 3 分で 0.41 ml ± 0.04 の平均沈降物量を生成しました。これは、12 時間での重力依存性沈降で観察された平均値 0.38 ml ± 0.03 と同様でした (p = 0.14) (図 3a、d、h) 。CentREUSE では、12 時間の重力沈降で観察された平均 0.38 ml ± 0.03 と比較して、5 分で 0.31 ml ± 0.02 というかなりコンパクトな体積が得られました（p = 0.0001）（図 3b、d、h）。
重力沈降を使用した CentREUSE 遠心分離と標準的な工業用遠心分離によって達成された TA ペレット密度の比較 (A ～ C)。CentREUSE の 3 分 (A)、5 分 (B)、および 10 分 (C) 使用後の 1.0 ml シリンジ内の沈殿した TA 懸濁液の代表的な画像。(D) 12 時間の重力沈降後の堆積 TA の代表的な画像。(EG) 10 RCF (E)、20 RCF (F)、および 50 RCF (G) で 5 分間標準的な市販遠心分離後の沈殿した TA の代表的な画像。(H) 沈降量は、CentREUSE (3、5、および 10 分)、重力媒介沈降 (12 時間)、および 5 分間の標準的な工業用遠心分離 (10、20、および 50 RCF) を使用して定量化されました。線は平均 (赤) ± 標準偏差 (黒) を表します。ドットは独立した繰り返しを表します (各条件の n = 9)。
CentREUSE では、5 分後に平均量 0.31 ml ± 0.02 が得られました。これは、標準的な市販の遠心分離機で 10 RCF で 5 分間観察された平均量 0.32 ml ± 0.03 と同様であり (p = 0.20)、平均量よりわずかに低かったです。 20 RCF で得られた結果は、0.28 ml ± 0.03 で 5 分間観察されました (p = 0.03) (図 3b、e、f、h)。CentREUSE は 10 分で 0.20 ml ± 0.02 の平均体積を生成しました。これは、50 RCF の市販の遠心分離機で観察された 5 分での平均体積 0.19 ml ± 0.01 と比較して、同じくらいコンパクトでした (p = 0.15) (図 3c、 g、h）。。
ここでは、従来の治療廃棄物から作られた超低コストのポータブル、人力操作の紙ベースの遠心分離機の設計、組み立て、実験的検証について説明します。この設計は主に、Prakash のグループが診断用途のために 2017 年に導入した紙ベースの遠心分離機 (「紙フーガ」と呼ばれる) に基づいています。遠心分離にはこれまで、高価でかさばる、電気に依存する商用機器の使用が必要であったことを考慮すると、Prakash の遠心分離機は、リソースが限られた環境での遠心分離への安全なアクセスの問題に対する洗練されたソリューションを提供します 2,4。それ以来、ペーパーフュージは、マラリア検出のための密度に基づく血液分別など、いくつかの少量診断アプリケーションで実用性を示しています。しかし、私たちの知る限り、同様の超安価な紙ベースの遠心分離装置は、通常より大量の沈降を必要とする症状である治療目的には使用されていません。
これを念頭に置いて、CentREUSE の目標は、治療介入における紙製遠心分離の使用を拡大することです。これは、Prakash の公開デザインにいくつかの変更を加えることで実現されました。特に、2 つの標準的な 1.0 ml シリンジの長さを長くするために、CentREUSE にはテストされた最大の Prakash 紙絞り器 (半径 = 85 mm) よりも大きなディスク (半径 = 123.5 mm) が含まれています。さらに、液体を充填した 1.0 ml シリンジの余分な重量を支えるために、CentREUSE ではボール紙の代わりに段ボールを使用しています。これらの改良により、Prakash ペーパー クリーナー (つまり、キャピラリー付き 2 つの 1.0 ml シリンジ) でテストしたものよりも大量の遠心分離が可能になり、同時に同様のコンポーネント (フィラメントと紙ベースの材料) に依存します。特に、他のいくつかの安価な人力遠心分離機が診断目的で報告されています4、5、6、7、8、9、10。これらには、スピナー、サラダビーター、卵ビーター、回転装置用のハンドトーチ 5、6、7、8、9 が含まれます。ただし、これらの装置のほとんどは、最大 1.0 ml の容量を処理できるように設計されておらず、多くの場合より高価な材料で構成されています。紙製遠心分離機で使用されるものよりもアクセスできません2、4、5、6、7、8、9、10。。実際、廃棄された紙資料はどこにでもあることがよくあります。たとえば、米国では、紙と板紙が都市固形廃棄物の 20% 以上を占めており、紙製遠心分離機を構築するための豊富で安価な、あるいは無料の供給源となっています。例: CentREUSE11。また、公開されている他のいくつかの低コスト ソリューションと比較して、CentREUSE は作成に特殊なハードウェア (3D プリンティングのハードウェアとソフトウェア、レーザー切断のハードウェアとソフトウェアなど) を必要としないため、ハードウェアのリソースがより多く消費されます。。これらの人々は環境 4、8、9、10 にいます。
当社の紙製遠心分離機が治療目的で実際に有用であることの証明として、硝子体ボーラス注射におけるトリアムシノロン懸濁液のアセトン (TA) 溶液の迅速かつ信頼性の高い沈降を実証しました。これは、さまざまな眼疾患の長期治療のための確立された低コスト介入です1 、３．CentREUSE による 3 分間の沈降結果は、重力による 12 時間の沈降後の結果と同等でした。さらに、5 分間および 10 分間の遠心分離後の CentREUSE の結果は、重力によって得られる結果を上回り、それぞれ 10 および 50 RCF で 5 分間の工業用遠心分離後に観察された結果と同様でした。特に、私たちの経験では、CentREUSE はテストされた他の方法よりも鮮明で滑らかな沈殿物と上澄みの界面を生成します。これは、投与された薬物の用量をより正確に評価できるようになり、粒子体積の損失を最小限に抑えて上清を除去するのが容易になるため、望ましいことです。
概念実証としてこのアプリケーションを選択したのは、リソースが限られた状況で長時間作用型硝子体内ステロイドへのアクセスを改善するという継続的なニーズによって推進されました。硝子体内ステロイドは、糖尿病性黄斑浮腫、加齢黄斑変性、網膜血管閉塞、ぶどう膜炎、放射線網膜症、嚢胞性黄斑浮腫など、さまざまな眼疾患の治療に広く使用されています3,12。硝子体内投与に利用できるステロイドの中で、TA は依然として世界中で最も一般的に使用されています 12。TA 防腐剤 (PF-TA) を含まない製剤も入手可能ですが (例、Triesence [40 mg/mL、Alcon、フォートワース、米国])、ベンジルアルコール防腐剤を使用した製剤 (例、Kenalog-40 [40 mg/mL、Bristol-米国ニューヨーク州マイヤーズ スクイブ]) が依然として最も人気があります3,12。後者のグループの薬剤は筋肉内および関節内の使用のみについて米国食品医薬品局 (FDA) によって承認されているため、眼内投与は未登録とみなされていることに注意してください 3, 12 。硝子体内 TA の注射可能な用量は適応症や技術によって異なりますが、最も一般的に報告されている用量は 4.0 mg (つまり、40 mg/ml 溶液から 0.1 ml の注射量) で、通常、治療期間は約 3 か月になります。 、12、13、14、15。
慢性、重度、または再発性の眼疾患における硝子体内ステロイドの作用を延長するために、デキサメタゾン 0.7 mg (Ozurdex、Allergan、ダブリン、アイルランド)、リラックスフッ化物アセトニド 0.59 mg (Retisert) など、いくつかの長時間作用型の埋め込み型または注射型ステロイド装置が導入されています。 、ボシュロム、ラヴァル、カナダ）およびフルオシノロンアセトニド 0.19 mg（Iluvien、Alimera Sciences、アルファレッタ、ジョージア州、米国）3,12。ただし、これらのデバイスには潜在的な欠点がいくつかあります。米国では、各機器は少数の適応症に対してのみ承認されており、保険適用範囲が制限されています。さらに、一部のデバイスは外科的移植が必要であり、前房へのデバイスの移動などの特有の合併症を引き起こす可能性があります 3,12。さらに、これらのデバイスは TA3,12 に比べて入手が難しく、はるかに高価になる傾向があります。現在の米国の価格では、Kenalog-40 は懸濁液 1.0 ml あたり約 20 ドルですが、Ozurdex、Retisert、および Iluvien は外植されています。入場料は約1400ドルです。、それぞれ20,000ドルと9,200ドル。これらの要因により、リソースが限られた環境にいる人々のデバイスへのアクセスが制限されます。
硝子体内 TA1、3、16、17 の効果を延長する試みは、その低コスト、より寛大な償還、およびより高い入手可能性により行われてきました。TA は水溶解度が低いため、デポとして眼内に留まり、徐々に比較的一定した薬物拡散が可能となるため、デポが大きいほど効果が長く持続すると予想されます 1,3。この目的を達成するために、硝子体に注射する前に TA 懸濁液を濃縮するいくつかの方法が開発されました。受動的（すなわち、重力依存）沈降または精密濾過に基づく方法が記載されているが、これらの方法は比較的時間がかかり、結果もばらつきがある15、16、17。それどころか、これまでの研究では、遠心分離を利用した沈殿により TA を迅速かつ確実に濃縮できる (したがって作用が持続する) ことが示されています 1,3。結論として、遠心濃縮 TA の利便性、低コスト、持続時間、および有効性により、この介入はリソースが限られた状況の患者にとって魅力的な選択肢となります。しかし、信頼性の高い遠心分離が利用できないことが、この介入の実施に対する大きな障壁となる可能性があります。この問題に対処することで、CentREUSE はリソースが限られた環境での患者に対する長期ステロイド療法の利用可能性を高めることができます。
私たちの調査には、CentREUSE アプライアンスに固有の機能に関連するものなど、いくつかの制限があります。このデバイスは人間の入力に依存する非線形で非保存的な発振器であるため、使用中に正確で一定の回転速度を提供することができません。回転速度は、デバイスの所有権レベルに対するユーザーの影響、機器の組み立てに使用される特定の材料、回転される接続の品質など、いくつかの変数によって決まります。これは、回転速度を一貫して正確に適用できる商用機器とは異なります。さらに、CentREUSE によって達成される速度は、他の遠心分離装置によって達成される速度と比較して比較的控えめであると考えられます2。幸いなことに、私たちの装置によって生成された速度（およびそれに伴う遠心力）は、私たちの研究で詳述された概念（つまり、TA の堆積）をテストするのに十分でした。回転速度は、中心ディスク２の質量を軽くすることによって増加させることができる。これは、液体で満たされた 2 本の注射器を保持するのに十分な強度がある場合、より軽い材料 (薄いボール紙など) を使用することで実現できます。私たちの場合、標準的な「A」スロット付きボール紙 (厚さ 4.8 mm) を使用するという決定は意図的でした。この材料は配送用の箱によく使われており、リサイクル可能な材料として簡単に見つかるからです。回転速度は、中心ディスク２の半径を小さくすることによっても増加させることができる。ただし、プラットフォームの半径は、1.0 ml シリンジを収容できるように意図的に比較的大きく作られています。ユーザーがより短い容器の遠心分離に興味がある場合は、半径を小さくすることができます。この変更により、予想通り、より高い回転速度 (および場合によってはより高い遠心力) が発生します。
さらに、オペレーターの疲労が機器の機能に及ぼす影響を慎重に評価していません。興味深いことに、私たちのグループの何人かのメンバーは、目立った疲労を感じることなく 15 分間デバイスを使用することができました。より長い遠心分離機が必要な場合のオペレーターの疲労に対する潜在的な解決策は、(可能であれば) 2 人以上のユーザーをローテーションすることです。さらに、デバイスの耐久性については批判的に評価しませんでした。その理由の 1 つは、デバイスのコンポーネント (ボール紙やコードなど) は、摩耗や損傷が発生した場合に、ほとんど、またはまったく費用をかけずに簡単に交換できるためです。興味深いことに、パイロット テストでは 1 台のデバイスを合計 200 分以上使用しました。この期間を過ぎると、目立つものの軽度の摩耗の兆候は、糸に沿った穴あきだけになります。
私たちの研究のもう 1 つの限界は、CentREUSE デバイスやその他の方法で達成できる、堆積した TA の質量または密度を具体的に測定していないことです。代わりに、この装置の実験的検証は、堆積物密度 (ml 単位) の測定に基づいていました。密度の間接的な尺度。さらに、当社は CentREUSE 濃縮 TA を患者に対してテストしていませんが、当社の装置は市販の遠心分離機を使用して生成されたものと同様の TA ペレットを生成したため、CentREUSE 濃縮 TA は以前に使用されていたものと同様に効果的で安全であると想定しました。文学で。従来の遠心分離装置について報告されています1、3。CentREUSE強化後に投与されるTAの実際の量を定量化する追加の研究は、この用途における当社のデバイスの実際の有用性をさらに評価するのに役立つ可能性があります。
私たちの知る限り、CentREUSE は、すぐに入手できる廃棄物から簡単に組み立てることができる装置で、治療現場で使用される初の人力式、ポータブル、超低コストの紙製遠心分離機です。CentREUSE は、比較的大量の遠心分離ができることに加えて、公開されている他の低コスト遠心分離機と比較して、特殊な材料や構築ツールを使用する必要がありません。迅速かつ信頼性の高い TA 沈殿における CentREUSE の有効性が証明されたことは、資源が限られた状況にある人々の長期にわたる硝子体内ステロイドの利用可能性を改善するのに役立つ可能性があり、これはさまざまな眼疾患の治療に役立つ可能性があります。さらに、当社のポータブル人力遠心分離機のメリットは、先進国の大規模な第 3 次および第 4 次保健センターなどの資源が豊富な場所にも予想通り広がります。このような状況下では、遠心分離装置の利用は引き続き臨床研究室や研究室に限定される可能性があり、注射器が人体液、動物製品、その他の危険物質で汚染されるリスクがあります。さらに、これらの研究室は患者のケアポイントから遠く離れた場所にあることがよくあります。これは、遠心分離に迅速にアクセスする必要がある医療提供者にとって、物流上のハードルとなる可能性があります。CentREUSE の導入は、患者ケアを大幅に中断することなく、短期間で治療介入を準備する実用的な方法として役立ちます。
したがって、誰でも遠心分離を必要とする治療介入の準備を容易にするために、CentREUSE を作成するためのテンプレートと手順が、このオープンソース出版物の「追加情報」セクションに含まれています。必要に応じて CentREUSE を再設計することをお勧めします。
この研究の結果を裏付けるデータは、合理的な要求に応じて各 SM 著者から入手できます。
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SM は、米国マサチューセッツ州ボストンのマサチューセッツ眼科耳鼻科病院、向井財団への寄付によって一部支援されています。
ハーバード大学眼科、マサチューセッツ眼科、243 Charles St、ボストン、マサチューセッツ州、02114、米国